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关于kromasil色谱柱的干货知识!
发布时间:2019-12-03   点击次数:91次
   关于kromasil色谱柱的干货知识!
  高效液相色谱是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。
  kromasil色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持kromasil色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。尽管经过数十年的发展,出现了各种各样的专用kromasil色谱柱,如制备柱、分析柱和各种微型柱,但kromasil色谱柱主体上仍由柱体、柱内填料和两端的接头组成。由于使用了高效填料,并不需要很长的柱长,常规分析柱多为15~30 cm的直型柱。由于高效液相kromasil色谱柱要承受系统高压,所以柱体一般选用金属材质。大部分kromasil色谱柱的接头为通用尺寸,可互换使用。
  kromasil色谱柱的正确使用
  1、加装保护柱:保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(50~100次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
  2、过滤流动相和样品 :流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过kromasil色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别 。
  3、净化样品 :样品中含有对kromasil色谱柱有损害的化学成分,如产生吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。
  4、避免过高的柱压 :避免的方法为(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱zui大允许压力的一半为宜。(2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。
  5、注意温度和酸碱度 :一般以硅胶为基质的kromasil色谱柱zui高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。目前的键合硅胶kromasil色谱柱标示的pH适用范围可达2~10,但在实际使用时应避免极端的pH条件,特别是在偏碱性的条件(pH≥8)下使用。如必须要在极端的pH条件下使用时,可通过以下方法避免柱损害:(1)在泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相;(2)降低使用温度;(3)检验完毕后立即用与所使用的流动相互相混溶的“温和溶剂”彻底清洗。

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